苹果MpMYB96基因克隆和功能鉴定

赵先炎1, 齐晨辉2, 姜翰1, 钟明爽2, 李媛媛2,*, 郝玉金2,*
1西北农林科技大学园艺学院, 旱区作物逆境生物学国家重点实验室, 陕西苹果重点实验室, 陕西杨凌712100; 2山东农业大学园艺科学与工程学院, 作物生物学国家重点实验室, 山东省果蔬优质高效生产协同创新中心, 农业部 黄淮地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室, 山东泰安271018

通信作者:李媛媛

摘 要:

MpMYB96是拟南芥(Arabidopsis thaliana) AtMYB96的一个同源基因。为了探究MpMYB96在苹果(Malus pumila)中的功能, 本文以‘皇家嘎拉’苹果苗的cDNA为模板进行PCR扩增, 获得一个约1 000 bp的目的条带, 通过测序发现该基因长为1 029 bp, 序列与MpMYB96 (MDP0000144744, https://www.rosaceae.org/)的序列一致, 该蛋白序列含有两个SANT保守结构域。进化树分析了15个物种MYB96蛋白的亲缘关系, 表明MpMYB96在不同物种中的功能是保守的。此外, 结果发现苹果MpMYB96与白梨(Pyrus bretschneideri) PbMYB96的亲缘关系最近, 说明MpMYB96和PbMYB96可能具有相同的功能。实时荧光定量PCR发现MpMYB96在花中表达量最高,茎中表达量次之, 根和叶中表达量均较低, 暗示MYB96可能在花中扮演更重要的角色。 MpMYB96的表达受脱落酸(ABA)、聚乙二醇(PEG)、水杨酸(SA)处理的诱导, 表明MpMYB96的功能可能涉及到了ABA和SA以及PEG模拟的干旱过程。将MpMYB96转化苹果愈伤组织, 检测转基因愈伤的表型, 发现MpMYB96过表达能够增加植物对ABA和PEG的敏感性, 并且能够对轮纹病产生一定的抵抗能力。

关键词:苹果; MpMYB96; 脱落酸; 聚乙二醇; 轮纹病

收稿:2018-11-17   修定:2019-05-21

资助:国家自然科学基金(31772275)和山东省自然科学基金优青项目(ZR2018JL014)。

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